Parasti lietoto fluorescējošo krāsvielu ieviešana

Feb 05, 2020 Atstāj ziņu

Fluorescējošas krāsvielas attiecas uz vielām, kas izstaro noteikta viļņa garuma gaismas viļņu, kas ir lielāks par gaismas viļņu, kas absorbē gaismu, un galvenokārt ir savienojumi, kas satur benzola gredzenus vai heterociklus un kuriem ir konjugētas dubultās saites.

Parasti izmantotās fluorescējošās krāsvielas ir aprakstītas šādi:

(1) Imūnfluorescences marķēšanai parasti izmanto fluorescējošas krāsvielas

FITC (fluoresceīna izotiocianāts): zaļš 530 nm

PE (fikoeritrīns): oranži dzeltens 575 nm

488 nm viļņa garuma argona jonu lāzera ierosme

APC (alofikocianīns): sarkans 660 nm

630 nm viļņa garuma He-Ne lāzera vai sarkanā diode lāzera ierosme

PerCP (polifikoksantīna hlorofila proteīns): tumši sarkans 675 nm

PI (propīdija jodīds): oranži sarkans 620 nm

(2) Šūnu autofluorescence

Autofluorescences signāls ir trokšņa signāls, kas vairumā gadījumu traucēs specifisko fluorescences signālu izšķirtspēju un mērījumus. Mērot imūncitoķīmiju utt., Fluorescējošām antivielām ar zemu saistīšanās līmeni galvenais ir signāla un trokšņa attiecības uzlabošana.

(3) Imūnfluorescences marķējums

Parasti izmantotā marķiera krāsošana ir tieša imunofluorescences krāsošana un netieša imunofluorescences krāsošana. Veicot divu parametru vai daudzparametru analīzi, bieži vien ir nepieciešams veikt kombinētu fluorescējošu antivielu marķēšanu. Pašlaik ir divu krāsu, trīs krāsu un četru krāsu etiķetes.